1.kullanmadan önce kiti oda sıcaklığında 30 dakikadan fazla bekletin ve oda sıcaklığına geri dönün
(20 - 25°C).
2.gerekli miktarda enzim etiketli çıta alın, 2 kuyu boş kuyu ve 1 kuyu
Negatif/pozitif ayrı olarak, kullanılmamış çıtaları mümkün olan en kısa sürede kapatın ve 2 ~ 8ºC'de saklayın. Ile iki kez yıkayın
seyreltilmiş yıkama solüsyonu.
3.Boş kuyulara 50 μl numune seyreltilmiş çözeltisi ekleyin; 50 μl negatif ve pozitif ekleyin
Sırasıyla negatif ve pozitif kuyulara çözelti referanslama; her birine 50 μl enzim işareti ekleme
Hafifçe çalkalayarak karıştırın ve 37°C'de 30 dakika inkübe edin.
4.reaksiyon solüsyonunu atın, her bir kuyu 200 μl yıkama solüsyonu ekleyin ve durmaya gerek yoktur.
Yıkama solüsyonunu iyice çalkalayın, yıkama işlemini 5 kez tekrarlayın ve son olarak temiz emici üzerinde kurutun
kağıt.
5.her bir kuyu için 100 μl substrat solüsyonu ve oda sıcaklığında 15 dakika boyunca
karanlık.
7.her bir kuyu için 50 μl durdurma solüsyonu ekleyin ve iyice karıştırın. 10 dakika içinde 450 nm dalga boyu kullanın (630
nt, referans dalga boyu olarak kullanılabilir). HAYIR ise
Referans dalga boyu, sıfır ayarlamak için boş bir kuyu kullanın (tüm kuyuların absorbansı eksi absorbans
/ boş)
Sonuçlar:
Test koşulu, ortalama Negatif referans kuyusu ve
pozitif referans ≥ 0.5'dir.
Formül: Y = Numune Kuyu OD/Negatif Kuyu ortalama OD
Sonuç negatif veya şüpheli olduğunda, domuz antikor seviyesinin yetersiz olduğunu gösterir ve
buna göre aşılama önerisinde bulunmalı