Aflatoksin M1 Elisa süt Kiti

• Environmental Protection: Yes
• Certification: CE/ISO
• Color: White
• Classification: Food Diagnostic
• Function: Food Testing
• Appearance: Liquid
• Hayır. Modeli.: KA07201H
• Taşıma Paketi: Foam Box with Ice Bag
• Teknik Özelikler: 96T/Kit
• Ticari Marka: kwinbon
• Menşei: China
• HS Kodu: 38229000
• Üretim Kapasitesi: 50000PCS/Year

Ürün Açıklaması

M1 Aflatoksin Kantitatif Analizi için Rekabet enzim İmmünolojik Tayin

 

1. Arka plan

Aflatoksin M1 bir aflatoksin türüdür. Gösterilen oran, yiyeceklerde çok yüksek ve sıcak ve nemli alanlarda besleniyor. Fiziksel olarak bulunan özellik sabittir ve pastörizasyonla yok edilmesi kolay değildir. Memelinin alımı sonrasında aflatoksin B1 tarafından kirlenmiş besin veya gıda hidroksilasyon ile aflatoksin M1'e dönüştürülecektir. Aflatoksin M1'in başlıca tehlikeleri kanserojenite ve mutajenlik.  Hayvan karaciğerini yok ederek karaciğer kanserine ve hatta ölüme neden olabilir.
Bu kit, enzim immünoassay teknolojisine sahip yeni nesil ilaç kalıntısı testidir. Hız, kolaylık, doğruluk ve yüksek hassasiyet özelliklerine sahiptir. Çalışma süresi yalnızca 60 dakika sürer ve en fazla işlem hatasını ve iş yükünü azaltabilir.
2.Test İlkesi
Bu ELISA kiti, aflatoksin M1'i  "dolaylı olarak rekabet eden" enzim immünoassay temelinde tespit etmek için tasarlanmıştır.  Mikrotiter kuyuları BSA bağlantılı aflatoksin M1 antijeni ile kaplanmıştır.  Numunedeki Aflatoksin M1 , sınırlı sayıda antikor ile bağlantı için önceden kaplanmış antijenle rekabet eder. TMB substratından sonra  sinyal , bir ELISA fotometre ile ölçülür. Absorpsiyon, standart eğriye kıyasla numunedeki aflatokin M1 konsantrasyonu ile ters orantılıdır. Ardından karşılık gelen seyreltme oranıyla çarpın.  Ve numunedeki aflatokin M1 artıklarını hesaplayabilirsiniz.

3.uygulamalar
Bu kit, süt tozu, çiğ süt, peynir, Yoghourt, bitmiş süt (fıstık sütü, ceviz sütü, kahvaltı sütü, yüksek kalsiyum sütü) içinde aflatokin M1'in kalitatif ve kantitatif hızlı testi için kullanılabilir.

4.Çapraz tepkiler

Aflatoksin M1	%100
Aflatoksin B1	%164
Aflatoksin B2	%14
Aflatoksin G1	%85
Aflatoksin G2	%1

5.Ekipman gerekli ancak sağlanmadı
5.1 Ekipmanlar
--- ELISA okuyucu (450 nm/630 nm)
--- Shaker
--- vorteks karıştırıcı
--- Analitik denge (endüktans: 0,01 g)
--- Dereceli pipet: 10 ml
--- kauçuk pipet ampul
-- Polistiren santrifüj tüpü: 50 ml, 2 ml  
-- Mikropipetler: 20 μl - 200 μl, 100 μl - 1000 μl
50 μl-çoklama
5.2 reaktif
-- - Aketonitrile (AR)
--  Triklorometan (AR)
---  N-hekzan (AR)
--- deiyonize su
6.Kit Bileşenleri

1. Antijen ile kaplı 96 kuyulu mikrotiter plaka
2. Standart çözeltiler (6 şişe × 1 ml/şişe)

0ppb, 0,03ppb, 0,09ppb, 0,27ppb, 0,81ppb, 2,43 ppb

1. Enzim , 12 ml'lik konjuge......... kırmızı kapaklı
2. Antikor solüsyonu 7 ml.........….....green kapak
3. Substrat çözümü,   7 ml.........., beyaz kapak
4. Substrat çözeltisi B 7ml .... ... ... ... … … … kırmızı kapak
5. Çözümü 7ml........... ... durdurun … sarı kapak
6. 20 × konsantre yıkama solüsyonu 40 ml
7. ........................ ... şeffaf kapak
8. 2 × konsantre çıkarma solüsyonu  50 ml ... mavi kapak

7.Reaktiflerin Hazırlanması
Çözüm 1: Çıkarma çözümü
  2 × konsantre çıkarma solüsyonunu, numuneyi seyreltmek için kullanılacak 1:1 (2 ml konsantre çıkarma solüsyonu + 1 ml deiyonize su) hacim oranında deiyonize suyla seyreltin.
Çözüm 2: Yıkama solüsyonu
20 × konsantre yıkama solüsyonunu 1:19 hacim oranında deiyonize suyla seyreltin (örn plakaları yıkamak için kullanılacak 20 ml konsantre yıkama solüsyonu + 95 ml deiyonize su). Seyreltilmiş yıkama solüsyonu bir ay boyunca 4 ºC'de servis edilir.
8.Örnek Hazırlıkları
8.1 Çalıştırma öncesi uyarı ve önlemler:
(A) Deneme sürecinde lütfen tek seferlik ipuçları kullanın ve farklı reaktifleri absorbe ederken ipuçlarını değiştirin.
(B) tüm deneysel aletlerin temiz olduğundan emin olun.
(c) İşlenmemiş süt numunesi donmuş ortamda saklanmalıdır.
(D) İşlenmiş numuneler 4 saatten fazla depolanamaz.
8.2 süt (çiğ süt, hazır süt)
 Doğrudan analiz etmek için 50 μl süt numunesi alın.
8.3 Yoghourt
--- kekler tük numunesini tamamen karıştırın.
- - - -  2 ml polistiren santrifüj tüpüne karıştırdıktan sonra 200 μl yoghourt numunesi alın.
- - - 800 μl yıkama solüsyonu ekleyin (bkz. çözüm 2), tamamen karıştırmak için sallayın;
- - - -  Analiz için 50 μl alın.
8.4 süt tozu
-- 50 ml polistiren santrifüj tüpüne 1.0 ± 0,05 g süt tozu numunesi.
--- 8 ml deiyonize solüsyon ekleyin ve tamamen karıştırmak için sallayın.
-- Analiz için 50 μl alın.
8.5 peynir
--- peynir numunesini algılamadan önce bir kez daha deneyin.
-- 50 ml polistiren santrifüj tüpüne 1.0 ± 0,05 g ağırlıkta peynir numunesi. Tamamen karıştırmak için 3 ml deiyonize su ekleyin, 3 ml asetonitril, vorteks ekleyin.
-- ayırma için santrifüj: 3000 g/20 - 25 ºC/5 dak.    3 ml'lik üst kaplamanın içini 50 ml'lik temiz kuru bir tüpe alın.  15 saniye boyunca 6 ml triklorometan ve vorteks ekleyin.
- - -  Ayırma için santrifüj: 3000 g/20-25 ºC/5 dak. Süperatonu çıkarın ve düşük organik aşamanın 3 ml'lik kısmını 10 ml'lik temiz cam tüpe alın.  Nitrojen akışı altında 50-60ºC (122-140ºF) su banyosu ile kurutun.
-- 1 dakika boyunca 1 ml n-hekzan ve vorteks ekleyin. 1 ml çıkarma çözeltisi (çözüm 1) ve 20 sn. Için vorteks ekleyin. Ayırma için santrifüj: 3000 g/20-25 ºC/5 dak.
--- Aperantı organik fazını çıkarın ve assy için 50 μl daha düşük bir çözüm alın.
9.Analiz Süreci
9.1 Tayin öncesi uyarı
9.1.1 tüm reaktiflerin ve mikrokuyuların oda sıcaklığında (20-25ºC) olduğundan emin olun.
9.1.2 tüm kalan reaktifleri kullandıktan hemen sonra 2°C'ye geri getirin.
9.1.3 Mikrokuyuların doğru şekilde yıkanması analiz sürecinde önemli bir adımdır; ELISA analizinin tekrarlanabilirliği için hayati bir faktördür.
9.1.4 Lütfen inkübasyon sırasında doğrudan güneş ışığından kaçının, yani plaka kit içinde verilen plaka kapağıyla kapsanmalıdır.
9.2 Analiz adımları
9.2.1 tüm reaktifleri oda sıcaklığında (20-25ºC) 30 dakikadan uzun bir süre çıkarın.  Kullanmadan önce hafifçe sallayın.  
9.2.2 gerekli mikro kuyuları çıkarın ve geri kalanını derhal 2-8ºC'de kilitli torbaya koyun .
9.2.3 konsantre yıkama solüsyonu ve konsantre çıkarma solüsyonu  kullanımdan önce oda sıcaklığına getirilmelidir.
9.2.4 Sayı: Her mikrokuyunun konumunu ve tüm standartlar ile numunelerin çift olarak çalıştırılması gerekir. Standartları ve numune konumlarını kaydedin.
9.2.5 Standart/örnek ve  antikor solüsyonu ekleyin:  Karşılık gelen kuyulara 50µl standart solüsyon (kit bileşeni) veya hazır numune ekleyin. 50 µl antikor solüsyonu ilave ediniz (kit elemanı). Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın ve kapak ( veya karanlık bir yerde) ile 25ºC sıcaklıkta 30 dakika inkübe edin.
9.2.6  Yıkama: Kapağı yavaşça çıkarın ve suyu kuyulardan boşaltın ve mikro kuyuları  2  kez 10 sn aralıklarla 250µl seyreltilmiş yıkama solüsyonu (solüsyon 4-5) ile durulayın. Kalan suyu emici kağıtla emer (kalan hava kabarcığı kullanılmayan uçla giderilebilir).
9.2.7 Enzim konjugate'i ekleyin: Her bir kuyu 100 ul enzim konjugate ekleyin ve hafifçe sallayın. 25ºC sıcaklıkta 30 dakika boyunca kapaklı ( veya koyu renkli) inkübe edin.  Ve ardından 9.2.6. Adımı tekrarlayın.
9.2.8  renk: Her    kuyuya 50µl çözüm A (kit elemanı) ve 50µl çözüm B (kit elemanı) ekiniz. Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın ve  kapakla 25ºC'de 15 dakika inkübe edin (bkz. 12.8).
9.2.9  Ölçüm:  Her  bir kuyuya 50µl'lik bir Durma solüsyonu (kit elemanı) ekiniz. Plakayı manuel olarak sallayarak hafifçe karıştırın ve 450 nm'de absorbansı ölçün (450 nm'lik çift dalga boyuyla önerilen ölçüm. Stop solüsyonu eklendikten sonra 5 dakika içinde sonucu okuyun). (Mikroplaka okuyucusu yoksa, bunu durmadan görsel yöntemle değerlendirebilirsiniz.)

10.sonuçlar
10.1 absorbans yüzdesi
Standartlardan ve numunelerden elde edilen absorbans değerlerinin ortalama değerleri, ilk standardın absorbans değerine (sıfır standart) bölünür ve %100 ile çarpılır.
   =
B -- her bir standardın veya her bir numunenin ortalama absorbans değeri
B0 -- Sıfır standardının absorbans değeri
(2) Standart Eğri
Standart bir eğri çizmek için standartların y ekseni olarak absorbans değeri, x ekseni olarak standartların (ppb) konsantrasyonunun semilogaritmik değeri.
--  Kalibrasyon eğrisinden okunabilen her numunenin (ppb) aflatoksin M1 konsantrasyonu , takip edilen her numunenin karşılık gelen seyreltme faktörüyle çarpılır ve numunenin gerçek konsantrasyonu elde edilir.
Lütfen dikkat:
   Talep üzerine sağlanabilen tüm veri azaltımı için özel yazılım geliştirilmiştir.
Numune seyreltme oranı:
Süt numunesi (çiğ süt, hazır süt):...… 1
Yoghourt, peynir:............... ..5
Süt tozu:.................. …..8
11.Hassasiyet, doğruluk ve hassasiyet
Test Hassasiyeti: 0,03ppb
Algılama sınırı
Süt.................. …...... … 0,03ppb
Peynir, Yoghourt.................. … 0,15 ppb
Süt tozu........................ 0,25 ppb
Doğruluk
Süt........................... … %85 ± %15
PİYAYAYAYAYAYAYT......................... %85 ± %15
Süt tozu..................... ….%85 ±%15
Peynir........................ … %85 ± %15
Hassasiyet
ELISA kitinin C.V. oranı %10'den azdır.
12.Bildirim
12.1 Reaktifler ve numuneler oda sıcaklığına (20-25ºC) ayarlanmazsa standartlar ve numuneler için elde edilen ortalama absorbans değerleri azalır.  
12.2 başarısız tekrarlanabilirliği önlemek için mikropların adımlar arasında kurumasına izin vermeyin ve mikro kuyu tutucuya dokunduktan hemen sonra bir sonraki adımı uygulayın.
12.3. kullanmadan önce her bir reaktifi yavaşça sallayın.
12.4.H2SO4 solüsyonun yüksek konsantrasyonu olması için cildinizi durdurma solüsyonundan uzak tutun.
12.5 güncel olmama setlerini kullanmayın. Farklı gruplar için reaktifleri değiştirmeyin, aksi takdirde hassasiyet düşer.
12.6 ELISA kitlerini 2-8ºC sıcaklıkta saklayın, dondurmayın. Dinlenmek için kullanılan mikrokuytu plakalarını kapatın, tüm inkübaslar sırasında düz güneş ışığından kaçının. Mikrotiter plakaların örtülmüş olması önerilir.
12.7 Renk döndüğünde alt tabaka çözümü terk edilmelidir.  Sıfır standardının absorbans değeri (450/630 nm) 0.5'den (A450nm<0.5) azsa reaktifler kötü olabilir.
12.8 Renk reaksiyonu, çözüm A ve çözüm B'nin eklenmesinden 15 dakika sonra gerekir ancak renk belirlenemeyecek kadar açık olduğunda inkübasyon süresini 20 dakikaya veya daha fazla uzat, aksi halde İnkübasyon süresini doğru bir şekilde kısaltmayın.
12.9 sıcaklığın en iyi tepkisi 25°C olacaktır. Lütfen tüm adımlarda sıcaklığın doğru olduğundan emin olun. Yüksek veya düşük sıcaklık, deneme hatasına yol açar.  
13.Depolama
Saklama koşulu: 2-8ºC.
Depolama süresi: 12 ay